Elisa Kitleri Hakkında Önemli Bilgiler

Bölüm 1:

Temel ELISA Prosedürüne Genel Bir Bakış:

Siz, değerli müşterilerimize elisa kiti hakkında her şey paylaşmaya gayret ettik. Aşağıda açıklayıcı konulara mümkün oldukça net bir açıklık getirmek ve tanımlar yapıldı. Dünya literatürleri ve yayınlarından alıntılar yapmak ve proje ve çalışmalarınıza katkıda bulunmak istedik. Takılmadığınız konularda bizimle iletişime geçebilirisiniz.

ELISA, bir numunede bir analitik varlığını hesaplamak ve değerlendirmek için kullanılan popüler bir laboratuvar tekniği olan enzime bağlı immünosorbent tahlilin kısaltmasıdır. ELISA durumunda teknik, esasen test edilen numunedeki antikorların veya antijenler konsantrasyonunun saptanması için kullanılır.

Temel ELISA prosedürü, kan veya başka herhangi bir numunedeki antikor konsantrasyonunu belirleyen diğer testlerin aksine, söz konusu antikorun veya antijenin kesin miktarlarını sağlar. ELISA farklıdır, çünkü spesifik etkileşimlerin ve spesifik olmayan etkileşimlerin ayrılması bir polistirenden çoklu kuyucuklu plakaya seri bağlanma yoluyla sağlanır.

ELISA testinin benzersiz bir başka özelliği, test edilen numunedeki antijenlerin veya antikorların miktarına ve konsantrasyonuna bağlı olarak, renk kodlu sonuçları, son ürünün rengiyle formüle etmek için kullanılabilmesidir. Bu özellik, renk kodlu test sonuçlarının basitliğini sunmayan diğer prosedürlere kıyasla, bu prosedürün anlaşılması daha kolay olmasını sağlar.

Tipik elisa pleyt sonucu

ELISA prosedürünün diğer yararlarından bazıları şunlardır:
• Testler hızlı bir şekilde gerçekleştirilebilir; bu, hastanın testten geçmesi ve sonuç alması uzun süre beklemek zorunda olmadığı anlamına gelir.
• ELISA testi, ayrıntılı bir hazırlık veya diğer prosedür gerektirmeden normal bir ortamda yapılabilen basit bir testtir.
• Prosedür, büyük miktarda numunenin aynı anda test edilebilmesi ve değerlendirilebileceği şekilde tasarlanmıştır. Bu, testlerin çok sayıda yapılması gerektiğinde tercih edilen bir tanı yöntemidir.

ELISA öncelikle radyoimünoanaliz üzerine bir iyileştirme olarak geliştirildi. İlk olarak 70’li yılların başında tanıtılan temel prosedür bugün bile kullanılmaya devam ediyor. Tabii ki, daha yeni teknolojiler ve daha iyi donanımlar, prosedürün modifiye edilmiş versiyonlarının tanıtımını kolaylaştırdı. Değiştirilen versiyonlar arasında Doğrudan, Dolaylı, Sandviç ve Rekabet veya İnhibisyon prosedürleri bulunmaktadır. Bu modifiye edilmiş prosedürler aşağıdaki iyileştirmeleri sunmaktadır:
• ELISA’ler, tekli bir plakada hedef analit varlığını spesifik olarak ölçebilir.
• Bu prosedürler hassas parametrelerin çok doğru okunması ile ayrıntılı sonuçlar verir.
• Testler doğrudan hücreye veya hücre merkezli çıktı sağlar.

ELISA’ya Giriş

ELISA, enzime bağlı immünoassay anlamına gelir. Kandaki antikorları tespit etmek için yaygın olarak kullanılan bir laboratuvar testidir. Antikor, vücudun bağışıklık sistemi tarafından antijen adı verilen zararlı maddeleri tespit ettiğinde üretilen bir proteindir.

Kısaltma olarak da bilinen enzim bağlantılı immünosorbent assay, 1970’lerde ELISA yaratılmıştır. Bu ortak laboratuar testi, belirli bir solüsyondaki antikorlar veya antijenler olan bir analit konsantrasyonunu ölçer. ELISA ile, niceliksel sonuçlar algılanabilir ve bu da benzer diğer tip testlerden farklı olarak saptanır.

ELISA için temel prosedür bir kaplama basamağı ile başlar. Bu adımda, bir polistiren plaka antikorları veya antijenlere sahip bir solüsyon ile kaplanır. Sıvı atılır ve plaka yıkanır. Sonra engelleme adımdır. Bu adımda, protein bazlı ve birinci solüsyondan bağımsız bir çözüm, plakadaki bağlı olmayan bölgeleri kapsar. Bir kez daha, sıvı alınır ve plaka yıkanır. Tespit aşamasında, enzimle konjüge edilmiş antijen veya antikor, hedef antijene veya antikora bağlanır. Plaka daha sonra boşaltılır ve tekrar yıkanır. Son olarak, bir substrat plakaya yerleştirilir ve enzimin ve substratın reaksiyonu ile verilen sinyal ölçüldü.

ELISA Kitinin tipik bileşenleri
• Bir ELISA Kitinin tipik bileşenleri

Dört farklı ELISA testi türü vardır:

• Doğrudan Elisa kiti direk : Bu yöntem en hızlıdır ve daha az adım içerir. Aynı zamanda bir hataya daha yatkındır.

Şekil -1

Doğrudan ELISA ilkelerini göstermek için bir örnek olarak Şekil 1’i kullanıyoruz.

(1). Plaka yüzeyi virüs antijeni ile kaplanır.

(2). Enzime bağlı spesifik antikor, antijen ile etkileşime girer ve bir kompleks haline gelir.

(3). Substrat eklendiğinde enzimle reaksiyona girer ve saptanabilen bir renk değişikliği meydana getirir.

Not: Bu örnekte antijen “analit” (tespit etmek istediğimiz şey), antijenin varlığını saptamak için enzime bağlı antikor kullanıyoruz. Bununla birlikte, bazı ELISA testlerinde, antikor analittir. Bu durumda, antikoru saptamak için enzime bağlı antijeni kullanırız.

• Dolaylı Elisa kiti : Bu yöntem hassasiyeti arttırır ve daha az sayıda etiketli antikor gerektiği için daha az maliyetlidir.

Dolaylı ELISA ilkelerini göstermek için bir örnek olarak Şekil 2’yi kullanıyoruz.

(1). Antijen plaka yüzeyinde kaplanır.

(2). Yakalama antikoru (birinci antikor), antijeni “yakalar” ve bir kompleks haline gelirler.

(3). Etiketlenen detektör antikoru, yakalama antikoruyla konjuge olur ve daha büyük bir kompleks haline gelir. Etiketi, antijeni dolaylı olarak algılayabiliriz.

Not: Bu örnekte antijen analittir, ancak birçok durumda antikor analittir. Bu nedenle, antikoru “yakalamak” için özel bir antijen ve antijen ile immünoaktif bölgeden başka bir siteyle etkileşime girmesi için özel bir detektör antikoru tasarlamamız gerekir

Şekil: 2

ddddmm Şekil: 3

• Sandviç ELISA kiti : Bu yöntemle daha fazla adım atılmalıdır. Bununla birlikte, sonuçlar son derece özeldir.

Şekil 4’ü, Sandviç (Sandwish) ELISA ilkelerini göstermek için örnek olarak kullanıyoruz.

(1) Plaka bir yakalama antikoru ile kaplanır.

(2) Numune eklenir, spesifik antijen (analit) yakalama antikora bağlanır.

(3) Daha sonra tespit antikoru ilave edilir ve antijene bağlanır.

(4) Enzime bağlı sekonder antikor eklenir ve tespit antikoruna bağlanır.

(5) Son olarak substrat ekleriz ve renk değişimini indüklemek için algılayan antikorla reaksiyona girer.

esdxa Sandviç elisa kit Şekil: 4

Not: Bu örnekte antijen analittir, diğer durumda antikor belki de analittir.

• Rekabet veya İnhibisyon ELISA : Bu yöntem genellikle sadece bir antikor mevcut olduğunda veya analit kük olduğunda kullanılır.

Rekabetçi ELISA ilkelerini göstermek için örnek olarak kullanıyoruz.

(1) Algılamak istediğiniz antijenleri içeren örnekle Antikoru inkübe edin. Ve karmaşıklaşıyorlar.

(2) Antikor-antijen kompleksi, antijen ile önceden kaplanmış mikro-oyuklara ilave edilir. Dolayısıyla, serbest antikor, mikro kuyucuklarda kaplanan antijene bağlanabilir. Kompleksdeki antikor ve sınırsız antikor, yıkama ile çıkarılabilir

(3) Daha sonra birincil antikora özdeş Enzim bağlı sekonder antikoru ekledik. Tekrar yıkayın.

(4) Son olarak, bir renk değişikliği yaratmak için enzimle reaksiyona giren substrat ekledik. Numunedeki antijen konsantrasyonu ne kadar yüksek olursa, zayıf renk görüntülenir.

Not : Diğer ELISA test tiplerinden farklı olarak, daha az emilim, numunede daha yüksek analit konsantrasyonu anlamına gelir.

gwg Şekil:5

ELISA’nın yapılmasına yönelik bu farklı yöntemlere ek olarak, farklı tespit yöntemleri de vardır; doğrudan ve dolaylı.

ELISA testinin sonuçları niceliksel, nitel veya yarı niceliksel olabilir. Sonuçlar genellikle onu diğer sonuçlarla karşılaştırmak ve kesin sonuçlara gelmek için grafiksel olarak gösterilir. Nicel sonuçlar standart bir eğriye kıyasla okunur. Niteliksel sonuçlar sadece bir antijenin var olup olmadığı konusunda bir evet ya da hayır verir. Yarı niceliksel sonuçlar nispi seviyelerde karşılaştırılmıştır.

Bu test, bugün mevcut olan en hassas immünoassay testlerinden biridir. Duyarlılık, antikor-antijen reaksiyonunun özelliklerine bağlı olacaktır. Sonuçları iyileştirmek için laboratuar, gelişmiş bir kimyasal ışık verme veya floresan sinyali veren substratlar gibi bir substrat ekleyebilir.

– Bölüm 1 –

Temel ELISA Prosedürüne Genel Bakış: – ELISA prosedürleri, özellikleri, faydaları, geliştirmeleri

ELISA, bir numunede bir analitin varlığını hesaplamak ve değerlendirmek için kullanılan popüler bir laboratuvar tekniği olan enzime bağlı immünosorbent tahlilin kısaltmasıdır. ELISA durumunda teknik, esasen test edilen numunedeki antikorların veya antijenler konsantrasyonunun saptanması için kullanılır.

ELISA testinin benzersiz bir başka özelliği, test edilen numunedeki antijenlere veya antikorların miktarına ve konsantrasyonuna bağlı olarak, renk kodlu sonuçları, son ürünün rengiyle formüle etmek için kullanılabilmesidir. Bu özellik, renk kodlu test sonuçlarının basitliğini sunmayan diğer prosedürlere kıyasla, bu prosedürün anlaşılması daha kolay olmasını sağlar.

Bir şerit kuyucuk pleytin tipik ELISA çıktısı
• Şerit kuyucuk pleytinin tipik ELISA çıktısı
ELISA prosedürünün diğer yararlarından bazıları şunlardır:
• Testler hızlı bir şekilde gerçekleştirilebilir; bu, hastanın testten geçmesi ve sonuç alması uzun süre beklemek zorunda olmadığı anlamına gelir.
• ELISA testi, ayrıntılı bir hazırlık veya diğer prosedür gerektirmeden normal bir ortamda yapılabilen basit bir testtir.
• Prosedür, büyük miktarda numunenin aynı anda test edilebilmesi ve değerlendirilebileceği şekilde tasarlanmıştır. Bu, testlerin çok sayıda yapılması gerektiğinde tercih edilen bir tanı yöntemidir.

ELISA öncelikle radyoimünoanaliz üzerine bir iyileştirme olarak geliştirildi. İlk olarak 70’li yılların başında tanıtılan temel prosedür bugün bile kullanılmaya devam ediyor. Tabii ki, daha yeni teknolojiler ve daha iyi donanımlar, prosedürün modifiye edilmiş versiyonlarının tanıtımını kolaylaştırdı. Değiştirilen versiyonlar arasında Doğrudan, Dolaylı, Sandviç ve Rekabet veya İnhibisyon prosedürleri bulunmaktadır. Bu modifiye edilmiş prosedürler aşağıdaki iyileştirmeleri sunmaktadır:
• ELISA’ler, tekli bir pleyt hedefin analit varlığını spesifik olarak ölçebilir.
• Bu prosedürler hassas parametrelerin çok doğru okunması ile ayrıntılı sonuçlar verir.
• Testler doğrudan hücreye veya hücre merkezli çıktı sağlar.

– Bölüm 2 –

ELISA Test Türlerini Anlamak — ELISA’nın avantajları, Direkt, Sandviç, Rekabetçi ELISA

İmmunoassaylar, bir solüsyondaki analit konsantrasyonunun ölçülmesinde kullanılan biyokimyasal testlerdir. İlk olarak 1950’lerde icat edildi ve 1960’larda gelişti. Onlar çeşitli biçimlerde gelirler.

Enzim bağlantılı immunosorbent testi (veya daha yaygın olarak bilinen ELISA) 1970’lerde geliştirildi ve o zamana kadar sıkça kullanılmış radyoimmunoassay tekniğinin yerini aldı. ELISA genellikle hastaneler, klinikler ve tıbbi laboratuvarlar tarafından tanı aracı olarak kullanılır. Çeşitli ticaret endüstrileri ayrıca bunu bir kalite kontrol kontrol yöntemi olarak kullanmaktadırlar ve gıda endüstrileri ticari gıda ürünlerinde potansiyel alerjenlerin varlığını saptamak için kullanmaktadırlar.

ELISA’nın Avantajları

ELISA duyarlılığı diğer immunoassaylardan daha yüksektir. Dahası ELISA, bir doktor, laboratuvar teknisyeni veya şirket yöneticisinin belirli bir analitin belirli bir analitin ne kadarının herhangi bir çözeltide mevcut olduğunu açıkça görmesini sağlayacak niceliksel sonuçlar sağlayabilir.

Aynı anda çok miktarda numuneyi eşzamanlı olarak işlemek üzere tasarlandığından ELISA test tekniği de hızlıdır. Ayrıca şirketler, bu testlerin nasıl uygulanacağı ve sonuçlarını nasıl ele alacakları konusunda şirketleri kolayca eğitmelerini sağlayarak basittir.

ELISA Test Türleri

Üç temel ELISA test yöntemi vardır. Bunlar Doğrudan ELISA, Sandwich ELISA ve Rekabetçi ELISA’dır. Direkt ELISA testleri, niceliksel veya niteliksel olarak yapılabilir. Niceliksel sonuçlar söz konusu numunenin optik yoğunluğunu standart bir eğriye kıyaslarken nitel sonuçlar “evet” veya “hayır” olarak listelenir. Sandviç ELISA testleri numune antijeni saptarken Rekabetçi ELISA testleri HIV virüsünün varlığını saptamak için kullanılır ve yukarıda bahsedilen ELISA test yöntemlerinden biraz farklı bir metodoloji kullanır.

Enzim bağlantılı immünosorbent tahlil test metodunun sunacağı çok şey vardır. Doktorların sağlık koşullarını teşhis ve tedavi etmelerine yardımcı olur, anti-doping ajansları tarafından sporcuların yasadışı uyuşturucu kullanmamalarını ve şirketlerin kendilerine ihtiyaç duyanlar için alerjen içermeyen yiyecek maddeleri üretmelerini sağlamasını sağlar. ELISA, hızlı, verimli ve duyarlıdır ve herhangi bir tıbbi veya endüstri profesyonelinin gereksinimlerine uygun çeşitli test seçenekleri sunmaktadır.

-Bölüm 3-

ELISA Algılama Seçeneklerini Tanımlama: İki ELISA algılama seçeneği: Doğrudan ve dolaylı

Bir ELISA gerçekleştirirken, enzimler, bir antikorun spesifik bir antijene bağlandığını gösteren bir sinyal algılama yeteneği üreten bir etiket olarak kullanılır. Proses, enzimlerin ve enzim substratlarının farklı çeşitlerini, bunları eklemenin biraz farklı yöntemleri ile birlikte kullanabilir. Seçilen substrata bağlı olarak, floresan veya spektrofotometrik bir pleyt okuyucu, nihai testi elde etmek için sinyali ölçebilir.

Dolaylı ve direkt olarak, iki ELISA algılama seçeneği, bir ELISA ölçümünün hassasiyetini büyük ölçüde belirler. Bununla birlikte, stratejilerin şartları kafa karıştırıcı olabilir, çünkü çeşitli uygulamalar olabilir. Amacımız açısından, ELISA’nın algılama bölümüne uygulandığında şartlar aşağıdaki şekilde tanımlanacaktır:

Doğrudan saptama, bu türden en yaygın kullanılan stratejiyi belirtir. Bu, yaban turpu peroksidaz (HRP) veya alkalin fosfataz (AP) substratını kullanarak antikorları doğrudan etiketlemeyi içerir. Bunlar, bir spektrofotometre ile kolorimetrik ölçüme izin verecek bir renk reaktifi üretir. Floresanla bağlanmış bir immünosorbent deneyine, flüoresan etiketli antikorlar kullanılarak da ulaşılabilir.

Doğrudan tespit hızlıdır; ulaşmak için daha az adım gerekir. Buna ek olarak, ikincil bir antikorun çapraz reaksiyonu ortadan kaldırılmıştır. Bununla birlikte, süreç sinyalin sadece en az amplifikasyonuna izin verir. Her bir özel ELISA sistemi birincil antikorların etiketlenmesini gerektirdiğinde de zaman alıcı olabilir.

En yaygın tipin dolaylı olarak saptanması antikorların biyotinle birleşmesini içerir ve bunu bir streptavidin-konjuge enzim uygulayarak takip eder. Etiketsiz olan birincil antikorların kullanımı, biyotinlenmiş veya enzim ile birleşmiş sekonder antikorlar ile takip edildiğinde de mümkündür. Bununla birlikte, bir biyotinlenmiş ikincil antikor kullanılıyorsa, bu durumda uygun bir substrat ile bir streptavidin-konjügat muamelesi gerektiren tespit için bir başka adım gereklidir.

Dolaylı tespit, ELISA için en sık kullanılan formattır. Ticari piyasada bulunan çok çeşitli etiketlenmiş sekonder antikorların kullanımını sağlar. Aynı etiketli antikor, tek bir türe ait birçok birincil antikor ile tespit için kullanılabilir olduğundan, aynı zamanda çok yönlülük sunar. Sinyal amplifikasyonu kolayca elde edilebilir, bu nedenle hassasiyet arttırılır. Bununla birlikte, spesifik olmayan bir sinyal oluşturabilen sekonder antikor ile çapraz reaktivite şansı vardır. Süreç aynı zamanda ek bir inkübasyon adımını gerektirir.

-Bölüm 4-

ELISA Sonuçları: – Test Verileri: Nicel, Niteliksel, Yarı Kantitatif

ELISA, enzime bağlı immünosorbent testin kısaltması, bir solüsyondaki analit miktarlarını ölçen yaygın olarak kullanılan bir laboratuvar testidir. Çoğu durumda, analit genellikle bir antijen veya bir antikordur. Temel ELISA testi, bir polistirenden çoklu kuyucuklu pleyt veya başka bir katı yüzey tipi seri bağlama ile ortaya çıkan spesifik ve spesifik olmayan etkileşimlerin ayrılması nedeniyle, diğer vücut karşıtı olmayan testlerden farklıdır.

ELISA testi 1970’lerde oluşturuldu ve radyoimmunoassaylerin yerine geçti. ELISA’nın faydaları arasında gerçekleştirmek nispeten kolaydır ve büyük örneklerle paralel olarak gerçekleştirilebilir. Bu faydalar nedeniyle, ELISA, araştırmacılar tarafından ve tanı hedefleri için yaygın olarak kullanılmaktadır. ELISA’ların asıl formu bugün hala kullanılmaktadır. Bununla birlikte, kuyucuk başına birkaç analiti içerebilen genişletilmiş ve modifiye edilmiş formlar, doğrudan hücre bazlı çıktılar ve son derece hassas okunuşlar var.

ELISA testleri, bir antijen üzerinde bulunan amino asit dizisi ile eşleşen bir antikor bağlanma sitesi arasındaki spesifik etkileşime dayanmaktadır. ELISA testi için kullanılan antikorlar monoklonal veya poliklonal olabilir.

ELISA sonuçları üç farklı veri türüne neden olur:
• Kantitatif: Kantitatif verilerle, sonuçlar farklı örneklerdeki antijen konsantrasyonlarının kesin olarak belirlenmesine izin veren standart bir eğriyle karşılaştırılarak yorumlanır.
• Kalitatif : Niteliksel veriler, belirli bir antijenin varlığının bir numunede olup olmadığını teyit eder veya reddeder. Bu veri evet veya hayır cevabı olup, ilgisiz bir kontrol antijeni veya başka herhangi bir antijen içermeyen boş bir kuyucuğa kıyasla kullanılır.
• Yarı kantitatif : Bir sinyal yoğunluğu doğrudan antijen konsantrasyonuna bağlı olarak farklılık gösterebilir. ELISA verileri, bir deney numunesi içindeki antijenlerinin nispi seviyelerini karşılaştırmak için kullanılabilir.

Genellikle, ELISA analizlerinden elde edilen veriler optik yoğunluk ve log konsantrasyonu kullanılarak grafikleştirilir. Bu, sigmoidal bir eğri ortaya çıkaracaktır. Grafiğin standart eğrisini vermek için bilinen herhangi bir konsantrasyon antijen kullanılır. Daha sonra, bu veriler, standart eğrinin doğrusal bölümüyle karşılaştırıldığında bilinmeyen örneklerin konsantrasyonunun ölçülmesinde kullanılabilir. Grafikleme, kağıtta veya genellikle ELISA pleyt okuyucularında bulunan eğri uydurma yazılımıyla gerçekleştirilebilir.

–Bölüm 5-

ELISA ve ELISA Hassasiyetine İlişkin Bilgiler:– ELISA: Mevcut en hassas immünoassaylar

ELISA aslında bitki patolojisi ve tıbbında sıkça kullanılan bir tanı aracıdır. Kalite kontrol için bir araç olarak çeşitli endüstrilerde de kullanılır. Bir sıvı numunede nicel veya nitel olarak analiz edilen spesifik maddenin (veya analitin) tespitini içerir. Bu teknik, değerlendirme süreci boyunca sıvı reaktifleri kullanmaya devam etmektedir. Reaktifler sıvı halde kalır ve bir reaksiyon odası içinde kalır. Aynı zamanda tepkenleri de içerirler.

ELISA, analitik reaksiyon karışımının bazı bileşenlerini ayıran heterojen bir deneydir. Belirli bileşenlerin katı, fiziksel olarak hareketsiz hale getirilmiş faza adsorbe edilmesi bunu yapar. ELISA’da katı faz, üzerinde sıvı bir numunenin yerleştirildiği özel bağlanma özelliklerine sahiptir. Bunu birden fazla sıvı reaktifin sırayla eklenmesi, reaktiflerin inkübe edilmesi ve yıkanması takip eder. Kuyucuktaki sıvının bir miktar optik değişimi olacaktır. Analit varlığı bu sıvıdan ölçülecektir.

Bu, tipik olarak, spektrofotometre ile bulaşan ışığın konsantrasyonunun keşfedilmesine dayanan nitel bir okuma oluşturacaktır. Bu, belirli spesifik ışık dalga boyunun sıvı yoluyla iletilmesini nicelleştirmeyi içerir. Keşif duyarlılığı, analitik reaksiyonlar sırasında sinyallerin nasıl güçlendirildiğine bağlıdır. Enzim reaksiyonları iyi bilinen amplifikasyon prosesleridir. Ek olarak enzimler reaktiflere sabit oranlarda bağlanan sinyal üretirler. Bu doğru miktarı belirleme olanağı sağlar.

ELISA Hassasiyeti
ELISA’lar mevcut en duyarlı bağışıklık testleri arasındadır. 0.01 ng & 0.1 ng veya 0.1 v& 1 fmol arasında tipik bir saptama aralığı vardır. ELISA duyarlılığı, antikor ile antijen arasındaki etkileşimin spesifik özelliklerine dayanır. Ek olarak, flüoresan sinyali veren veya arttırılmış kemilüminesan veren bazı substratlar, sonuçların iyileştirilmesi için kullanılabilir. Dolaylı algılama, daha yüksek seviyelerde sinyal üretir ve bu nedenle daha fazla duyarlılığa sahip olmalıdır. Bununla birlikte, aynı zamanda, net belirli sinyal düzeylerini düşüren artmış arka plan sinyali ile sonuçlanabilir.

ELISA’ler hızlı ve kolay bir şekilde gerçekleştirilir. Paralel örneklerin büyük bir kısmını hızlı bir şekilde işlemek üzere tasarlanmıştır. Bu nedenle, çok sayıda farklı araştırma ve teşhis hedeflerini analiz etmek için sıklıkla kullanılırlar.

Kaynak:

1.JG Feinberg, Alan W. Wheeler. Otomatik bağışıklık antikoru ve doku antijenlerinin “mikro spot” tekniği ile tespiti. J Clin Pathol. 1963 Mayıs; 16 (3): 282-284.

2. White AM, Collett JR, Seurynck-Servoss SL, Daly DS, Zangar RC. ELISA-BASE: ELISA mikrodizisi verilerini analiz etmek ve izlemek için entegre bir biyoinformatik araç. Biyoinformatik. 2009 15 Haziran 25 (12): 1566-7. Doi: 10.1093 / bioinformatics / btp182. Epub 2009, 3 Nis.

3. Rudolf M. Lequin. Enzim İmmünoassay (EIA) / Enzim Bağlı İmmunosorbent Testi (ELISA). Clinical Chemistry 51:12 2415-2418 (2005).

ELISA Testleri: Prosedür, Tipler, Riskler veya Sonuçlar.

ELISA Test Merkezi

Osteoporoz Slayt Gösterisi Resimleri

Kemikleriniz İçin Süper Gıdalar Slayt Gösterisi Resimleri

Osteoporoz Testini Yap

ELISA nedir?

ELISA testi nedir?

ELISA testinin kullanımı nedir?

Sağlık çalışanları, ELISA testini nasıl gerçekleştirir?

ELISA testi nasıl çalışır?

ELISA türleri ve testleri nelerdir?

Doğrudan ELISA nedir?

ELISA testinin avantajları nelerdir?

İnsanlar ELISA testi için nasıl hazırlanırlar?

ELISA testi acı verir mi?

ELISA prosedürü ile ne gibi riskler söz konusudur?

ELISA test sonuçlarının alınması ne kadar sürüyor?

ELISA testinin sonuçları ne demektir?

ELISA, “enzim bağlı immunosorbent assay” için kullanılan bir kısaltmadır.

ELISA testi nedir?

Hikayenizi Paylaşın

Bir ELISA testi, vücudun bağışıklık yanıtlarının saptanması için bağışıklık sisteminin bileşenlerini( IgG veya IgM antikorları gibi) ve kimyasalları( örneğin bulaşıcı mikropları) kullanır. ELISA testinde bir enzim( bir biyokimyasal reaksiyonu katalize eden bir protein) bulunur. Aynı zamanda bir antikor veya antijen( immünolojik moleküller) de içerir. ELISA testinin kullanımına örnekler, HIV( insan bağışıklık eksikliği virüsü) ve bazı gıda allerjileri gibi alerjik hastalıklar gibi enfeksiyonları teşhis etmektir. ELISA testleri, immünosorbent bir test olarak da tanımlanır.

ELISA testinin kullanımı nedir?

ELISA testleri öncelikle proteinlerin( küçük moleküllerin ve glikoz ve potasyum gibi iyonların aksine) tespiti için kullanılır. ELISA testleri ile tespit edilen maddeler hormonları, viral antijenler( örneğin dang humması), bakteriyel antijenler( TB gibi) ve vücudun enfeksiyona yanıt olarak oluşturduğu antikorları( örneğin hepatit B’ye karşı antikorları) veya aşılama.

ELISA kiti nedir?

Bir ELISA kiti, genellikle pre-coated polistren plakalar, tespit antikorları ve genellikle bir ELISA testi yapmak için gereken kimyasalların hepsini içeren piyasada bulunan bir ELISA testidir. Bununla birlikte, özel kitler müşteri tarafından belirlenen maddelerle birlikte satın alınabilir.

Sağlık çalışanlarının ELISA testi nasıl yürütülmektedir?

Testi yürüten sağlık personeli, antikorların antikorlarla olan etkileşimini ölçen özel kitler kullanan eğitimli laboratuvar teknisyenleridir. Test sonuçlarını doktorunuza bildireceklerdir.

ELISA testi nasıl çalışır?

ELISA testinde değişiklikler vardır( aşağıya bakın), ancak en çok kullanılan tip katı bir yüzeye( polistiren plaka) bağlanmış bir antikordur. Bu antikor, bir hormon, bakteri veya başka bir antikor gibi ilgi maddesine yakınlık gösterir( ilgi gösterecektir).Örneğin, insan koryonik gonadotropin hormonu( HCG), gebeliği gösteren yaygın olarak ölçülen protein, ELISA ile tespit edilebilir. Bir enzime ve test numunesine( kan veya idrar) bağlı saflaştırılmış HCG’nin bir karışımı test sistemine eklenir. Test örneğinde HCG yoksa, yalnızca bağlanmış enzim katı yüzeye bağlanır. Test örneğinde bulunan ilgi konusu madde miktarı ne kadar fazla olursa, bağlanmayan enzim katı yüzeye bağlanır.İlgilenen maddenin fazlası o kadar çok olduğunda, reaksiyona neden olacak ve çözeltinin renginde bir değişiklik( veya “iki pembe çizgi” ya da “iki pembe çizgi” gibi bir gebelik testi gibi test plakasında görünecektir.işaret).

ELISA Test Türleri

HIV Test

Genellikle bir kan örneğinde, çoğunlukla ELISA veya EIA adı verilen bir enzime bağlı test kullanılarak antikor testi yapılır. Bu testte, bir kişinin serumunun laboratuarda üretilen virüs proteinleri ile reaksiyona girmesine izin verilir. Kişi HIV bulaşmışsa, serumdaki antikorlar HIV proteinlerine bağlanır ve bu bağlanma derecesi ölçülebilir. Negatif ÇED sonuçları genellikle bir gün içinde geçerlidir.

HIV testleri hakkında daha fazla bilgi;

ELISA türleri ve testleri nelerdir?

Doğrudan ELISA nedir?

ELISA testlerinin dört tipi veya türü vardır:
Doğrudan ELISA: bir antijenin bir polistiren plakaya eklenmesi, ardından antijen ve ölçülebilen bir substrat ile reaksiyona girebilen bir enzim etiketli antikor
Dolaylı ELISA: birantijenini bir polistiren plakaya takiben etiketlenmemiş veya birincil bir antikoru takiben birincil antikor ve substrat ile reaksiyona girebilen bir enzim etiketli antikor izler.
Sandwich ELISA: Bir yakalama antikoru polistiren plakaya bağlanır, daha sonra antijen eklenir,veya antijeni yakalar. Aynı zamanda, antijen için spesifik olan fakat yakalama antikoru ile aynı olmayan ikinci bir antikor da eklenir ve antijene “sandviç” yapılır. Bu ikinci antikor daha sonra, ölçülebilen bir substratla reaksiyona girebilen, ikinci antikora özgü bir enzim etiketli antikor izlemektedir.
Rekabetçi ELISA: Bu test, sandviç ELISA’ya benzemektedir, ancak ikinciantikor ilave edilir. Bu, üretilen alt tabaka sinyalinde bir azalmaya neden olur. Bu testin, iyi, oldukça spesifik sonuçlar verdiğini düşünüyoruz.

ELISA testinin avantajları nelerdir?

ELISA testleri genellikle iyi ve doğru testlerdir.Çok hassas ve spesifik( doğru) kabul edilirler ve vücuttaki maddelerin tespiti için kullanılan diğer yöntemlerle olumlu olarak karşılaştınlırlar. ELISA test yöntemi, genellikle radyoaktif materyal gerektiren daha eski laboratuvar tekniklerinden daha basit ve gerçekleştirilmesi daha kolaydır.

İnsanlar ELISA testine nasıl hazırlanırlar? ELISA testi acı verir mi? Bir ELISA prosedürüne ne gibi riskler katılmıştır?

Genel olarak, insanlar ELISA testine hazırlanmak zorunda değildir. Test bir laboratuarda yapılır. Kanınız gerekliyse tek zarar kan dolaşımındadır. ELISA testiyle ilişkili riskler nadirdir ve kan alınması ile ilişkilidir( örneğin enfeksiyon, damar hasarı).

ELISA test sonuçlarının alınması ne kadar sürüyor?

Sınamanın hangi dilde kullanıldığına bağlı olarak, test yerel olarak yapılırsa, yaklaşık 24 saat kadar hızlı sonuç alabilirsiniz. Bununla birlikte, haftalarca sürebilen bazı testler var.

ELISA testinin sonuçları ne demektir?

ELISA testlerinde yüzlerce varyasyon vardır. Sonuçlar ve anlamları, neyin test edildiğine bağlıdır.Örneğin, viral RNA için bir ELISA testi onu( pozitif test) algılayabilir, algılayamaz( negatif bir test) veya belirsiz olabilir( sınır testi).Nadiren yanlış yanlış veya yanlış pozitif sonuç ile sonuçlanabilir. ELISA testi yaptırdıysanız, en iyi yaklaşım doktorunuza test sonuçlarının bireysel durumunuza ne anlam ifade ettiğini sorun.

‘dan Daha İyi Migren Yönetmenize Yönelik İpuçları

Tıbbi olarak 2 /23/ 2017

REFERANS:

Bonilla, Francisco A. “İmmünoglobülinlerin işlevleri ve klinik uygulamaları.”Ocak 2017. YukarıToDate.com.& lt; https://www.uptodate.com/contents/ immünoglobülinlerin fonksiyon ve klinik uygulamaları-source = search_result & search = elisa + OR + enzim + linked + immunosorbent + assay & selectedTitle = 3-150.

İletişim için Tıklayınız:

elisa kitleri bap

elisa kitleri soğuk zincir

elisa kitleri soğuk zincirde nasıl